酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）因其具有敏感性高、特異性強等優(yōu)點，被廣泛應用于臨床檢測中的各種抗原和抗體的測定。盡管ELISA操作簡單，但是小實驗里也蘊含著大文章，ELISA操作各個環(huán)節(jié)對實驗的檢測效果影響較大，稍不注意就會產(chǎn)生假陽性或假陰性的結果。

　　一般，ELISA可分為以下四大類：直接ELISA、間接ELISA、夾心ELISA、競爭抑制ELISA。其他的ELISA都隸屬于這四類ELISA或由這四類ELISA組合衍生。

　　樣品收集和保存

　　用于ELISA測定常用的臨床標本是血清（漿）。要注意避免嚴重溶血，因為血紅蛋白中含有具有類似過氧化物活性的血紅素基團，在孵育時很容易吸附于固相，與HRP底物反應產(chǎn)生假陽性。

　　樣品采集及血清分離中要注意避免細菌污染，一方面細菌分泌的酶可能對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用，另一方面，細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶會對相應酶作標記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。

　　樣品應該要避免反復凍融。因反復凍融所產(chǎn)生的機械剪切力對標本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結果。另外，樣品混勻時，不要劇烈振蕩，反復顛倒混勻即可。

　　一般而言，如果在收集樣品的當天進行檢測，可將樣品及時儲存在4℃?zhèn)溆?；而對隔天再檢測的樣本，應及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?，若要長期保存樣品，將其置于-70℃凍存。