ELISA試劑盒產(chǎn)品具有良好的吸附性能,白紙也相對(duì)較低,孔底有較高的透明度,適用于血清血漿組織勻漿細(xì)胞培養(yǎng)基尿液等樣品類型,其中血清是常見的標(biāo)本之一.下面一起來了解一下ELISA試劑盒血清標(biāo)本保存注意事項(xiàng):
一在采集樣品和分離血清時(shí),應(yīng)盡可能避免細(xì)菌污染.在一種情況下,細(xì)菌分泌的一些酶可能分解抗原和抗體等蛋白質(zhì);第二,一些內(nèi)生酶,如大腸桿菌中的?-半乳糖苷酶,會(huì)干擾以相應(yīng)酶標(biāo)記的測(cè)定方法.
二如果用無菌手術(shù)分離血清樣本,可在2℃保存一周,如果酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)滅菌,建議冷凍保存,樣品應(yīng)長(zhǎng)期保存在-70℃以下.
三冰凍血清樣本應(yīng)注意避免因斷電等引起的反復(fù)凍融,反復(fù)凍融產(chǎn)生的機(jī)械剪切力會(huì)破壞樣品中的蛋白質(zhì)和其他分子,造成假陰性結(jié)果.此外,凍融標(biāo)本混合也要小心,不要?jiǎng)×艺袷?反復(fù)反混合.
四應(yīng)注意避免嚴(yán)重的溶血.血紅蛋白含有類似過氧化物的血紅素基團(tuán),因此,在測(cè)定HRP作為標(biāo)記酶時(shí),如果血清樣品中血紅蛋白濃度較高,則在孵育過程中容易吸附到固相,因此與HRP底物發(fā)生反應(yīng).
五用細(xì)菌污染引起的混濁或絮體保存樣品時(shí),應(yīng)離心沉淀,然后取涂片進(jìn)行檢測(cè).
Elisa中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗(yàn)前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上.平衡時(shí)間太短會(huì)造成試劑混勻不夠,樣品孵育時(shí)間相對(duì)縮短,ELISA反應(yīng)不夠充分.冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘.