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分享ELISA實(shí)驗(yàn)加樣的操作方法

更新時(shí)間:2023-02-22點(diǎn)擊次數(shù):564
  ELISA實(shí)驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
  分享ELISA實(shí)驗(yàn)加樣的操作方法:
  1、標(biāo)本為血清:最好將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
  2、加樣后及時(shí)放入孵箱。
  3、加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
  4、如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,最好選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
  5、標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
  6、血清樣本的加入幾乎是的要使用微量加樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點(diǎn)是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無(wú)法保證微量加樣的性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。

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