產(chǎn)品名稱：大鼠腫瘤壞死因子Uβelisa試劑盒

規(guī)格：   48/96T

方法：   雙抗夾心法  間接法

保存：  試劑盒未拆開，4℃保存。已拆開，標準品-20℃保存，其它4℃保存。

用途：  僅供科研

品牌：瑞番

陽性對照：
陽性對照的基本組成應該盡量與檢測樣本的組成*，一般陽性對照多以含蛋白保護劑的緩沖液為基質(zhì)，加入一定量的待檢物質(zhì)。

陰性對照：
zui好先行檢測確定其中不含待檢物質(zhì)。比如：檢測人血清標本時，陰性對照應該選擇正常人血清；檢測免疫動物血清中抗體效價時，陰性對照應該選擇該動物的免疫前血清。
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雙抗體夾心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

3.　加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

大鼠腫瘤壞死因子Uβelisa試劑盒試劑盒注意事項:
}1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
}2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
}3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
}4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
}5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
}6．底物請避光保存。
}7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
}8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
}9．本試劑不同批號組分不得混用。
}10．如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

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