elisa具有敏感性高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體的測(cè)定，為輔助臨床診斷與生物科研起到了積極的推動(dòng)作用。但elisa測(cè)定中影響因素較多，操作過程中每個(gè)環(huán)節(jié)都會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響，出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。

　　試劑的選擇：試劑的選擇是保證血液檢測(cè)質(zhì)量的關(guān)鍵要素。雖然國家采用批批檢定的形式對(duì)elisa試劑嚴(yán)格把關(guān)，但不同的試劑在使用效果上仍存在在差異。要選購度相對(duì)高、具有“三證”的試劑，不要用無批號(hào)的試劑，選用與儀器配套的試劑。更不要使用過期的試劑和混用不同批號(hào)的試劑。

　　試劑的準(zhǔn)備：在臨床實(shí)驗(yàn)室，對(duì)試劑的準(zhǔn)備一般不太注意，通常的做法是在實(shí)驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來即用，而忽略了這種做法有可能影響后面時(shí)間不夠的問題，其直接的后果是對(duì)一些弱陽性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性。因此，在elisa測(cè)定中試劑的準(zhǔn)備為關(guān)鍵的是，將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30min后，再進(jìn)行測(cè)定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測(cè)定需求。

　　抗原與抗體、抗體與酶標(biāo)抗體反應(yīng)一般在37℃2h～3h達(dá)到高峰。時(shí)間太短,敏感性下降,時(shí)間太長,吸附的抗原或復(fù)合物(在這個(gè)溫度下)可能脫落。酶底物反應(yīng)時(shí)間的確定：一般采用15min～30min～45min。也可以標(biāo)準(zhǔn)陽性血清為準(zhǔn),隨時(shí)測(cè)定其OD值,當(dāng)達(dá)到規(guī)定的OD值時(shí),即終止反應(yīng)。